CRISPR技术依赖于Cas9和sgRNA实现“精准”切割，简化实验步骤，大大缩短实验周期，在用于疾病治疗等方面上被寄予了厚望，必将从实验室走向医疗领域！

1.CRISPR-Cas9用于治疗原发性开角型青光眼

       原发性开角型青光眼（POAG）山东小白鼠是Z常见的青光眼类型，约占所有青光眼的60%~70%。是由于眼压升高为基本特征，进而引起视神经损害和视野缺损Z终导致失明的慢性进行性眼病。根据美国Quigley的估算，2000 年全球的青光眼患者达6700万人，到2020年全球将有青光眼患者7960万，其中原发性开角型青光眼占2/3~3/4。在亚洲，原发性青光眼的患病率在一般人群中是0.68%。

       来自于美国Iowa大学的Ankur Jain等人于2017年8月25日在PNAS发表论文，利用CRISPR-Cas9技术对引起开角型青光眼的标志基因MYOC(Myocilin)进行编辑。MYOC正常表达时为分泌蛋白。当在人体突变后，济南小白鼠蛋白不能正常折叠在胞内累积替代分泌，会导致非折叠蛋白级联反应和网内压升高反应，使蛋白转录下降和升高分子伴侣的水平以促进折叠，这些反馈调节引起了眼内压升高，导致开角型青光眼。MYOC属于功能获得型基因。 

    Ankur Jain等人通过CRISPR-Cas9技术体外实验降低了胞内MYOC表达，降低了前房内压，阻止青光眼继续恶化。而且进一步通过转基因小鼠和人的离体POAG病理组织测定MYOC表达量证明在体内有效。为CRISPR-Cas9技术临床治疗开角型青光眼提供了有力证据。（图片来自于网络）

2.FACS联合CRISPR-Cas9技术促进帕金森疾病模型的建立

       帕金森病帕金森病(PD)又名震颤麻痹，是一种常见的中老年人神经系统变性疾病。帕金森病是老年人中第四位Z常见的神经变性疾病。建立帕金森疾病的模型，是研究疾病治疗的基础。

       基因编辑和诱导多功能干细胞被认为对发展近等基因系和矫正疾病相关的近等基因突变组织治疗有很大的希望。synuclein是一种有三种类型的含144个氨基酸的蛋白，是可能导致PD的潜在蛋白，其中是α-synuclein构成Lewy body的主要蛋白质成分。目前CRISPR-Cas9开始逐渐做为一个通用的和简便的编辑工具作用于人的细胞。然而，此方法产生的基因编辑突变体系需求大量的筛选，去筛选到一个非自由组合或特定位点非同源修复的等位基因突变体工作巨大。

       LCSB机构（Luxembourg Centre for Systems Biomedicine）的Jonathan Arias-Fuenzalida等人于2017年8月26号在stemcr发表文章称找到一个有效的方法，即加入荧光标记去诱导双等位基因编辑的工具，此技术称为FACE（FACS-assisted CRISPR-Cas9 editing）。FACE允许诱导矫正编辑的克隆和去除非编辑，自由组合和靶向NHEJ修复保护的细胞。Jonathan Arias-Fuenzalida等人成功得到一系列等基因突变体包含α-synuclein的突变导致的帕金森疾病模型。帕金森疾病NESCs（neuroepithelial stem cells）展现出了线粒体能量受损的表型。（图片来自于文献）